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法國科瑪嘉STEC顯色培養(yǎng)基
用于產志賀毒素大腸桿菌(STEC)的檢測
組 分
法國科瑪嘉STEC顯色培養(yǎng)基和ESBL增補劑各一瓶。
基礎培養(yǎng)基:瓊脂 15.0 g/L 蛋白胨和酵母粉 8.0 g/L 鹽類5.2g/L
色素2.6 g/L
增 補 劑:10ml/L
pH值 6.9
操作
1、基礎干粉:取瓶內干粉30.8g溶于1000mL去離子水的潔凈三角瓶中,充分攪拌混勻。也可根據需要按照30.8g/L的比例擴大或縮小制備培養(yǎng)基的量。
2、加熱至100℃,不停攪拌,使其*溶解。切勿加熱超過100℃,切勿121℃高壓滅菌。若使用微波爐加熱,應將培養(yǎng)基加熱沸騰,立即移出,輕輕搖勻,再放入微波爐加熱,觀察小氣泡變?yōu)榇髿馀荩敝?溶解即可。切勿使培養(yǎng)基溢出。
3、增補劑:取增補劑1瓶加入10mL無菌去離子水中,攪拌均勻。
4、將混勻后的增補劑加入到冷卻至45℃~50℃的基礎培養(yǎng)基中,輕輕地搖動均勻,傾注平皿,使其凝固,晾干備用。
保存 該成品平板在室溫可保存一天或在冰箱內貯存1個月(2℃~8℃,避光)。
未使用完的STEC增補劑在2-8℃環(huán)境中保存2個月。
接種
劃線或涂布接種(冰箱內保存的平板使用前應恢復至室溫),在36
結果
微生物(Microorganism) | 菌落顏色 |
產志賀毒素大腸桿菌 | 淡紫色 |
其他腸桿菌 | 藍色,無色或被抑制 |
其他革蘭氏陽性菌 | 抑制 |
注:在365nm紫外燈照射下,產志賀毒素大腸桿菌O157菌落無熒光。 |
性能及局限
一些產志賀毒素大腸桿菌在該培養(yǎng)基上生長微弱或不生長。一些罕見的不產志賀毒素大腸桿菌也可能出現(xiàn)紫色熒光菌落。較為罕見的大腸桿菌O157菌落也可能熒光。后的鑒定必須通過補充實驗。血清學鑒定可直接從該培養(yǎng)基上挑取菌落進行試驗。
貯存條件
基礎培養(yǎng)基和,增補劑需保存于15℃~30℃干燥環(huán)境中,在有效期前使用。
污染處理
使用過的培養(yǎng)基需要在121℃滅菌至少20分鐘才可以按照有關規(guī)定丟棄。
附:供體外診斷使用,產品須專業(yè)人員操作。